CK-免疫染色協同病理

Cytokeratin

最終更新日：2010.12.29

We are not selling antibodies. / Nous ne vendons pas d'anticorps. / Wir verkaufen keinen Antikorper.
No vendemos un anticuerpo. / 我們沒銷售抗體 / мы не продавать антило.
　抗体は販売していません。

Anti-	抗体名	略称	別名	HOST	CLONE名	適用
Human	Cytokeratin-PAN	Ck-pan	Ck5/6/8/18	Mouse	5D3	P*
Human	Cytokeratin-multi	AE1/AE3	Ck1-8/10/14/15/16/19	Mouse	AE1/AE3	P*
Human	Cytokeratin,Low MW	Ck-LMW	Ck10/14/15/16/19	Mouse	AE1	P*
Human	Cytokeratin,High MW	Ck-HMW	Ck1/5/10/14	Mouse	34βE12	P*
Porcine *	Cytokeratin,2A4	2A4	Ck8/18/19	Mouse	2A4	P*
Human	Cytokeratin,LP34	LP34	Ck6/18	Mouse	LP34	P*
Human	Cytokeratin,CAM5.2	CAM5.2	Ck8(19?)	Murine	CAM5.2	P*
Human	Cytokeratin 1	Ck1	(MW=68kD)	Mouse	34βB4	P*
Human	Cytokeratin 4	Ck4	(MW=59kD)	Mouse	6B10	P*
Human	Cytokeratin 5	Ck5	(MW=58kD)	Mouse	XM26	P*
Human	Cytokeratin 6	Ck6	(MW=56kD)	Mouse	LHK6B	P*
Human	Cytokeratin 7	Ck7	(MW=54kD)	Mouse	RN7	P*
Human	Cytokeratin 8	Ck8	(MW=52.5kD)	Mouse	TS1	P*
Human	Cytokeratin 10	Ck10	(MW=56.5kD)	Mouse	LHP1	P*
Human	Cytokeratin 14	Ck14	(MW=50kD)	Mouse	LL002	P*
Human	Cytokeratin 19	Ck19	(MW=40kD)	Mouse	b170	P*
Human	Cytokeratin 19	Ck19	(MW=40kD)	Mouse	RCK108	P*
Human	Cytokeratin 20	Ck20	(MW=46kD)	Mouse	Ks20.8	P*
Human	Keratin-wide	Kera	→Keratin	Rabbit	Poly	P*
Cow *	Keratin-wide	Kera	→Keratin	Rabbit	Poly	P*

（Cytokertinの分子量については測定法の差からか、資料によって若干違う。ここではソースとなった抗体メーカーの資料に従った。）

■　CYTOKERATIN　■

ケラチン（サイトケラチン）は上皮性細胞の細胞骨格を成す中間径（直径8～11nmほど）フィラメントであるが、単一のものではなく複数の遺伝子に支配される分子量40～68kDの蛋白群の総称である。分子量や生化学的分析によって20種類（から30種類ともいわれる）ほどの異なる蛋白に分類され、分子量の小さい type I （酸性ケラチン，CK9-20）と大きい type II（中性/塩基性ケラチン，CK1-8）に大別され、この両者が組み合わさったヘテロ二量体で網状のフィラメントを構成している。幾つか例外的なものもあるが大体分子量の大きいもの順に番号が付いており、概してtypeＩ、IIとも比較的高分子量のものの組合せは主に扁平上皮に含まれ、非扁平上皮には主に低分子量のものが含まれる。（重層扁平上皮ではCK5/14、単層上皮ではCK8/18がそれぞれの"primary cytokeratin"と呼ばれる）例えば皮膚重層扁平上皮の棘細胞層以上ではCK1/CK10、基底細胞層ではCK5/14が主に含まれ、付属器などでは場所によって中間に位置する4，6，13，16などが存在する。一方、単層円柱上皮（消化管）では主に低分子量のCK7,8/18-20が含まれ、特にCK8/18がよく見られるがCK7は胆管、乳管などでは見られるのに対して腸管ではみられないことが多い。逆に大腸や胆管ではCK20が見られるのに対し乳管では見られないことが多い。また前立腺など２層構造をとる腺管では基底側の細胞はCK5/14、内側の細胞はCK8/18や7/19の発現が見られる。（前立腺生検などで層構造を観察するのに重宝する）肝細胞はCK8/18のみ有するのでCK7/19，20を発現する胆管上皮と鑑別し易い。CK3/12は角膜に見られる。
Cytokeratinに対する抗体は（利用者が戸惑うほど）多くの種類があるが、一般にPolyclonal抗体（抗ケラチン）はそのうちの比較的高分子量ケラチンを主とする数種類と反応する。認識するcytokeratinが分子レベルで特定しにくいという点から”Wide”などと呼ばれるが、本当の意味での広範囲の分子を認識しているかどうかはわからない。（例えば免疫原に皮膚を用いたものであれば、皮膚の重層扁平上皮では幅広く反応するが、他の臓器では反応しないものがある。そういう点からは、むしろ AE1/AE3などのようなカクテル抗体の方がより広い範囲をカバーしているように思える）一方、Monoclonal抗体（抗サイトケラチン）については、一種類と反応する（と言われている）ものはその番号で、数種類と反応するものは”pan”や”multi”などと呼んで区別している。ちなみに上記のようにCK1/10，5/14でほとんどの扁平上皮と腺管の基底細胞に反応するのでこれらに対する抗体を"D&SE"（Duct & squamous epithelium）と呼ぶことがある。また「高分子量(HMW）」とも呼ぶが、表現としては正確さに欠ける。なお、Keratin/Cytokeratinはホルマリン固定により免疫活性が低下するのでトリプシン等の蛋白分解酵素処理が一般に必要であるほか、単一蛋白を認識する抗体には熱処理をしなければ反応しないものもあり、固定条件によっては再現性が悪いことがある。

Keratin	CK1	CK6	CK10
Keratin X400	CK1 X400	CK6 X400	CK10 X400
Polyclonal抗体では重層扁平上皮全層にわたり陽性。 CK1/10では基底層を除き陽性。逆にCK5/14では基底層に陽性。単層立方～円柱上皮細胞に発現するCK7，8/18，19，20などは陰性となる。
CK7,8,18-20	CK6	CK7	CK8
左からCK7,8,18,19,20	CK6 X400	CK7 X400	CK8 X400
CK14	CK17
CK14 X400	CK17 X400
CK14	CK17	CK14	CK17
CK14 X400	CK17 X400	CK14 X400	CK17 X400
毛根部、汗腺部でのCK14とCK17の反応性の違い。（CK14+/CK17+細胞とCK14+/CK17-細胞の分布）
CAM5.2	CK18	CK19	CK20
CAM5.2 X400	CK18 X400	CK19 X400	CK20 X400
CK-HMW	CK-LMW
CK-HMW X400	CK-LMW X400

市販されている主な抗Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ抗体のＣｌｏｎｅとその推定認識抗原

免疫組織化学を複雑にしている一因には似通った名称や憶え難い名称のものも含めて実に多数のクローンが供給されていることもあるかもしれません。抗Cytokeratin抗体についても抗原として認識するCytokeratin分子と関連性の乏しい名称のクローンが多数ありますので参考資料として表にしてみました。（厳密に言うとmonoclonal抗体はクローンが違えば「違うもの」と言えますが、その特異性において他のクローンとは区別されるべきものもあれば、特にクローンに拘るほどの差のないものもあります。）数社の市販抗体について調べただけでもこれだけありました。もっと調べればこの他にもまだ市販の抗体はあると思いますが、別に他意はありませんので御容赦ください。

2D5/18	Ck 7/8
34βB4	Ck 1
34βE12	Ck 1/5/10/14 Ck-HMW(D&SE)
35βH11	Ck 8
5D3 (NCL5D3)	(Ck 8/18)(Ck 8/18/19) (Ck 5/6/8/18) Ck-LMW
6B10	Ck 4
A3-3	Ck 10/13
A53-B/A2	Ck 19
A53-B/A2.26	Ck 19
AE1	Ck 10/14/15/16/19 typeI, basic Ck
AE2	Ck 1/2/10/11
AE3	Ck 1-8(1/2/5?) typeII, acidic Ck
AE5	Ck 3
AE8	Ck 1/2/3
BA17	Ck 19
b170	Ck 19
C04	Ck 18
C11	Ck 4/5/6/8/10/13/18
C18	Ck 7
C35	Ck 7
C50(C-50)	Ck 5/8
C51(C-51)	Ck 8
CAM5.2	Ck 8/19? (18??)
CK2	Ck 13
CK5/6.007	Ck 5/6
CK56	Ck 18
CY-90	Ck 18
D5/16B4	Ck 5/6
DBS/1(DBS/1.1)	pan Ck
DC10(DC-10)	Ck 18
DE-K10	Ck 10
DE-K13	Ck 10/13
DE-SQ	Ck-HMW (Like34βE12)
E3	Ck 7
IT-Ks20.3	Ck 20
IT-Ks20.5	Ck 20
K72.7	Ck 7
K92	55/56/60/62kD
KA4	Ck 14/15/16/19
Kg13.1	Ck 13
KL1(KL-1)	pan Ck？*

KS-1A3	Ck 13
Ks13.1	Ck 13
Ks17.E3	Ck 17
Ks18.4	Ck 18
Ks19.1	Ck 19
Ks8.60	Ck 1/10/11
Ks20.8	Ck 20
LDS-68	Ck 7
LH1	Ck 10
LH2	Ck 1/10
LHK15	Ck 15
LHK6B	Ck 6
LHP1	Ck 10
LL002	Ck 14
LL025	Ck 16
LP34	Ck 5/6/18
LP3K	Ck 8
LP5K	Ck 7
Lu-5(lu-5)	pan Ck (Ck 1-19)
M9	(Ck 13)(Ck 18)
MNF116	(Ck 5/6/8/17/19)(Ck 10/17/18/19) (45/46/56.5kD)(40/45/46/56kD)
OV-TL12/30	Ck 7
RCK102	Ck 5/8
RCK108	Ck 19
RKSE60	Ck 10
TS1	Ck 8/18
UCD/PR-10.11	Ck 8/18
ZSK3	pan Ck
Zym5.2	Ck 8/18
cocktail：
34βE12+35βH11	Ck 1/5/8/10/14
5D3+LP34	Ck 5/6/8/18
AE1+AE3	Ck 1-8/10/14/15/16/19
KS5+8.22/C22	?
注）　この表の内容はメーカーあるいは販売会社のデータシートまたはカタログの記載に基づいて作りました。　会社によって説明に食い違いのあるものは（　）で併記しています。（同じクローンのはずなのですが．．．）　また他社から供給された（所謂ＯＥＭ）抗体に対して識別のためか、クローン名称に若干の「細工」がされているのではないかと思われるものもあります。　好ましいこととは思えないのですが、一般論としてクローン名称についても少しアバウトに扱われているような気がします。

*例えばKL1はある論文ではCk1/2/3/4/10/11とあったが、
別のところでは55-57kDとあったというように不明確なものもあります

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